In vivo экзогенные цитокины могут оказывать влияние на вызванные вакцинацией иммунные ответы и, следовательно, изменять эффективность самой вакцины.
Цель настоящего исследования - разработка технологии получения высокоэффективных вакцин с помощью рекомбинантных и гибридных цитокинов. Мы исследовали эффекты различных цитокинов на протективные свойства и иммуногенность вакцины против возбудителя пастереллеза птиц из штамма P. multocida SM-1.
Исследования проведены на белых беспородных мышах весом 18-20 грамм и 8-и недельных цыплятах. В опытах использовали живую сухую вакцину против пастереллеза птиц из штамма P. multocida SM-1, вирулентный штамм P. multocida №576, фактор некроза опухолей-a, интерферон-a, интерферон- g, гибридные цитокины a1 тимозин-фактор некроза опухолей-a1 тимозин и фактор некроза опухолей-a1 тимозин.
Влияние цитокинов оценивали по показателю LD50 для вирулентного штамма в каждой группе и по титру антител в сыворотках крови экспериментальных животных в реакции непрямой гемагглютинации.
В экспериментах на мышах разведение вакцины с содержанием 1·106 клеток в 1 мл вводили подкожно в области внутренней поверхности бедра. Цитокины вводили непосредственно после введения вакцины в другое бедро в дозе 1мкг.
В экспериментах на цыплятах разведение вакцины с содержанием 1·109 клеток в 1 мл вводили подкожно в области внутренней поверхности бедра. Цитокины вводили сразу же после введения вакцины в другое бедро в дозе 1мкг на животное.
Заражение вирулентным штаммом P. multocida № 576 проводили через 2 недели после вакцинации и введения цитокинов. Непосредственно перед заражением вирулентным штаммом у трех мышей и трех цыплят из каждой группы брали кровь для определения титров антител. Для заражения использовали 5 доз: 10 м.к., 1·102 м.к., 1·103 м.к., 1·104 м.к., 1·105 м.к. За зараженными мышами и цыплятами наблюдали в течение 14 дней, ежедневно регистрируя количество погибших.
В результате проведенных исследований показано стимулирующее влияние цитокинов на протективность и иммуногенность исследуемой вакцины, определяемое по LD50 вирулентного штамма для каждой опытной группы животных, средней продолжительности жизни и по титру антител. LD50 вирулентного штамма и средняя продолжительность жизни была выше в группах с цитокинами (кроме группы цыплят получивших вакцину и интерферон-a ), по сравнению с группами получившими вакцину без цитокинов. Титры антител, при исследовании сывороток крови животных из групп получивших цитокины, были также выше в среднем в 2-3 раза по сравнению с группами животных получавших только вакцину. Отмечено, что 4-и из 5-ти тестированных цитокинов повышали протективность и иммуногенность вакцины.
Результаты проведенных исследований позволяют сделать заключение о том, что цитокины могут модулировать, вызванный вакцинацией антибактериальный иммунный ответ, оказывать стимулирующее влияние на протективные свойства и иммуногенность вакцинных препаратов.
Государственный научный центр прикладной микробиологии, 142279. Оболенск, Московская обл., Серпуховский р-н
Телефон: (0967) 36-08-45 из Москвы (27) 36-08-45
E-mail: vmborzenkov@mail.ru